โพสต์ในบล็อก
ความก้าวหน้าของ PCR: ก้าวข้ามขอบเขตของการขยาย DNA
การวินิจฉัยการวิจัยเทคโนโลยี PCR
ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) ได้รับการยอมรับมายาวนานว่าเป็นเทคโนโลยีการปฏิวัติในโลกของอณูชีววิทยา นับตั้งแต่ก่อตั้งในช่วงทศวรรษ 1980 โดย Kary Mullis ไปจนถึงการนำไปใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยและการวินิจฉัยสาขาต่างๆ การวินิจฉัยการวิจัยเทคโนโลยี PCR ได้เห็นการปรับปรุงอย่างมากในช่วงหลายปีที่ผ่านมา ในบทความนี้ เราจะเจาะลึกความก้าวหน้าล่าสุดในเทคโนโลยี PCR และวิธีที่เทคโนโลยีเหล่านี้ปรับเปลี่ยนการวิจัยทางพันธุกรรม
1. ดิจิทัลพีซีอาร์ (dPCR)
dPCR เป็นบุตรที่เกิดโดยตรงจาก PCR แบบดั้งเดิม แต่ให้การวัดปริมาณกรดนิวคลีอิกที่แม่นยำและแน่นอนมากกว่า ต่างจากรุ่นก่อนที่อิงจากการวัดจุดสิ้นสุด, dPCR ให้การนับจำนวนของโมเลกุล DNA เป้าหมายที่แน่นอน
2. PCR แบบเรียลไทม์ (qPCR)
PCR แบบเรียลไทม์หรือ PCR เชิงปริมาณ (qPCR) ได้กลายเป็นแกนนำในห้องปฏิบัติการหลายแห่ง เนื่องจากความสามารถในการวัดการขยาย DNA ที่เกิดขึ้นแบบเรียลไทม์ เทคโนโลยีนี้ใช้โพรบฟลูออเรสเซนต์ ช่วยให้นักวิจัยเห็นภาพการสะสมของผลิตภัณฑ์ที่ขยายขนาดในระหว่างกระบวนการ PCR
3. Reverse Transcription PCR (RT-PCR)
RT-PCR ซึ่งเป็นรูปแบบหนึ่งของ PCR เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยน RNA เป็น DNA ซึ่งทำให้สามารถตรวจจับไวรัส RNA ได้ เช่น ไวรัส SARS-CoV-2 ซึ่งเป็นสาเหตุของโรค COVID-19 บทบาทของมันในการทดสอบและการเฝ้าระวังในช่วงการระบาดใหญ่เน้นถึงความสำคัญของมันในด้านการวินิจฉัย โมเลกุล ในปัจจุบัน
คำแนะนำรูปภาพ 4: การแสดงภาพกระบวนการ RT-PCR
4. มัลติเพล็กซ์ PCR
ด้วยพลังในการขยายลำดับเป้าหมายหลายลำดับในปฏิกิริยาเดียว การวินิจฉัยการวิจัยเทคโนโลยี PCR แบบมัลติเพล็กซ์ ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีคุณค่าอย่างยิ่งในการตรวจหาจีโนไทป์และการตรวจหาเชื้อโรค เทคนิคนี้จะช่วยลดต้นทุน เวลา และปริมาณตัวอย่างที่จำเป็น
คำแนะนำรูปภาพ 5: ภาพเจลอิเล็กโตรโฟเรซิสที่แสดงแถบหลายแถบ แสดงถึงลำดับการขยายที่แตกต่างกัน
5. PCR แบบไอโซเทอร์มอล
การแยกตัวออกจากความต้องการเดิมๆ ในการใช้เครื่องหมุนเวียนความร้อนที่ทำให้อุณหภูมิเปลี่ยนแปลง PCR แบบไอโซเทอร์มอลจะขยาย DNA ที่อุณหภูมิคงที่ ความก้าวหน้านี้นำไปสู่อุปกรณ์ PCR แบบพกพา คุ้มค่า และเข้าถึงได้มากขึ้น จึงทำให้การวินิจฉัยภาคสนามเป็นจริง
อนาคตของ PCR
ความสามารถในการปรับตัวและการปรับปรุง PCR อย่างต่อเนื่องนั้นเป็นเรื่องที่น่าอัศจรรย์อย่างยิ่ง จากจุดเริ่มต้นเล็กๆ ไปจนถึงรูปแบบขั้นสูงที่เราใช้ในปัจจุบัน PCR ยังคงเป็นศูนย์กลางของการวิจัยทางพันธุกรรม การวินิจฉัยโรค และอื่นๆ อีกมากมาย
เรากำลังยืนอยู่บนจุดสูงสุดของนวัตกรรมใหม่ๆ ดังนั้น ด้วยการบูรณาการปัญญาประดิษฐ์ ระบบอัตโนมัติ และเทคโนโลยีนาโน PCR ยุคถัดไปจึงสัญญาว่าจะทำงานเร็วขึ้น แม่นยำยิ่งขึ้น และมีประสิทธิภาพมากขึ้น
